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高压液相色谱操作注意要点

高压液相色谱操作注意要点

1) 首先，对流动相进行过滤，根据实验需求选用合适的滤膜，通常为有机系和水系，滤膜孔径一般为0.20um和0.45um。

2) 之后，对过滤后的流动相进行超声脱气，时间约为10-20分钟，确保流动相的纯度。

3) 仪器启动时，先使用甲醇冲洗10-20分钟，然后切换至测试用流动相。若流动相为缓冲试剂，则需用重蒸水冲洗10-20分钟，直至有机相冲净。

4) 流动相冲洗20-30分钟后，仪器达到稳定状态。此时，仪器基线走动后，方可进行样品测试。

5) 进行两针标样测试，结果比值应在0.98-1.02之间，确保仪器的准确性，方可正式进行样品测试。

6) 样品测试完毕后，需对色谱仪和色谱柱进行清洗和维护。若流动相为缓冲试剂，同样需用重蒸水清洗10-20分钟，再用有机相进行保护，以防损伤色谱柱。

7) 关机时，应先关闭计算机，再关闭液相色谱，确保设备安全。

8) 最后，填写登记本，并由负责人签字，完成实验记录。

扩展资料

高效液相色谱法是在经典色谱法的基础上，引用了气相色谱的理论，在技术上，流动相改为高压输送（最高输送压力可达3.5万KPa）;色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料填充而成，从而使柱效大大高于经典液相色谱（每米塔板数可达几万或几十万）；同时柱后连有高灵敏度的检测器，可对流出物进行连续检测。