常用菌种保存方法

微生物广泛分布于自然界，包括细菌、螺旋体等，结构简单，以单细胞、细胞群体或非细胞状态存在。为了研究和使用，需要使用菌种保藏技术，以避免微生物死亡、污染，保持其原有性状稳定。以下介绍几种常见的菌种保存方法。

低温冷冻保藏法适用于大多数需要长期保存的微生物，如病毒等。在超低温环境下，微生物代谢活动停止，效果越好。使用冻存管保存菌种，需加入甘油、脱脂羊粉或二甲亚砜等保护剂，将含有菌种的冻存管置于-60~-80℃冰箱冷冻保存。

液体石蜡保藏法适用于不能分解石蜡的菌类，如酵母菌等。使用液体石蜡覆盖，微生物代谢被抑制，菌种老化推迟。此法能防止氧气进入，避免需氧菌生长，防止培养基水分蒸发导致细菌死亡。将灭菌的液体石蜡注入培养物上，液面高出斜面顶端1cm~2cm，加胶塞并用固体石蜡封口。存放在低温（4℃~6℃）或室温下。

冷冻干燥保藏法适用于大多数微生物的保存，但不适用于不产孢子的丝状真菌。此法在低温、干燥、缺氧条件下保藏菌种。快速冻结菌种，使微生物保持完整，减压抽直空使冰升华至脱水干燥。在直空状态密封隔绝空气，使微生物代谢活动停止，长期保藏。

沙土管保藏法适合产孢类放线菌、芽孢杆菌等的保存。使用细沙土创造干燥条件，抑制代谢活动，减少菌株突变，延长存活时间。将河、海沙、土壤处理后，与沙土混合均匀，分装于安瓿管或小试管中，加入菌悬液，放入真空干燥器中进行真空干燥。存放在低温（4℃~10℃）或常温干燥处，定期检查。

瓷珠保存法使用便于使用的瓷珠保存管，适用于低温保存菌种。表面凹凸的瓷珠用于细菌的吸附和保存。在-20℃或-80℃下长期保存菌种，操作简便。从平板上刮取细菌纯培养物，配置成麦氏浓度，加入保存液，低温冻存。