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免疫组织化学抗体反应

免疫组织化学抗体反应中,抗体可能产生交叉反应,这主要归因于以下几个因素:

1. 抗原特异性:当用于免疫动物的抗原中含有多种抗原分子,动物会产生针对这些分子的多特异性抗体。如果其他物质含有相同的抗原分子,就会引发与该多特异性抗体的交叉反应。

2. 共同决定簇:如果两种抗原分子具有相同的决定簇,即使它们是不同的抗原,也会导致交叉反应。

3. 决定簇相似性:即使结构相似,抗体也可能与非对应抗原发生反应,但这种反应的结合力通常较弱。

在抗体的特性比较方面,单抗和多抗有显著差异:

均一性:单抗是高度纯化的,一个抗体分子结构一致,而多抗则是由多种Ig类型混合。

稳定性:单抗对环境变化敏感,不如多抗稳定,后者的稳定性更好。

特异性:单抗对特定抗原决定簇高度特异,几乎无交叉反应,而多抗的特异性较差,易引起交叉反应。

重复性:单抗批次间一致性好,而多抗每批可能不同。

沉淀反应:多抗形成沉淀网络,单抗则形成二聚体。

抗体的存储要求严格,应选择不吸附蛋白的容器,如聚丙烯、聚碳酸酯或硼硅酸玻璃。低蛋白浓度的抗体需加隔离蛋白防止吸附。稀释的抗体通常在4-8℃保存,而原液和免疫球蛋白在-20℃保存,避免冻融。解冻时需缓慢进行,防止蛋白质损害。为防止细菌污染,可添加叠氮钠,干燥的抗体可长期保存在-20℃。对于稀释的单抗,建议加入叠氮钠。大部分抗体可冷冻保存,但个别可能会丧失活性。单抗在适当浓度下,可在4℃短期保存。

扩展资料

免疫组织化学又称免疫细胞化学,是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应,对相应抗原进行定性、定位、定量测定的一项新技术。它把免疫反应的特异性、组织化学的可见性巧妙地结合起来,借助显微镜(包括荧光显微镜、电子显微镜)的显像和放大作用,在细胞、亚细胞水平检测各种抗原物质(如蛋白质、多肽、酶、激素、病原体以及受体等)。 免疫组化技术近年来得到迅速发展。50年代还仅限于免疫荧光技术,50年代以后逐渐发展建立起高度敏感,且更为实用的免疫酶技术。

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