到底怎样计数细胞呢
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- 2025-05-04 09:50:12
细胞计数是一种常见的生物学实验技术,用于确定细胞悬液中的细胞数量。通常,计数方法如下:
取10ul细胞悬液与10ul台盼兰混合均匀,置于1.5ml离心管中。
盖上盖玻片,取10ul混合液自血球计数盘上方加入,通过10倍生物显微镜观察。
活细胞不染色,死细胞被染成蓝色。
分别计数四个大方格,得到细胞总数,再除以4,乘以稀释倍数(本实验为2),最后乘以104,即为每ml细胞悬液中细胞数。若细胞位于线上,只计上线与左线(计上不计下,计左不计右)。
每一大格的体积为0.1cm×0.1cm×0.01cm=10-4ml。计数板计数时,最适细胞浓度为5~10×105个/ml,此范围外计数误差偏大。
对于高浓度细胞悬液,可取出部分作稀释或连续稀释后计数。例如:
活细胞数/方格:55,62,49,59。
死细胞数/方格:5,3,4,6。
细胞总数=243,平均细胞数/方格=60.75。
稀释倍数=2。
细胞数/ml:60.75×104×2=1.22×106。
细胞数/flask(10ml):1.22×106×10ml=12.2×106。
存活率:225/243=92.6%。
细胞计数对于了解细胞生长状态、细胞培养条件、药物作用效果等都至关重要。准确的细胞计数能够帮助研究人员更好地理解细胞行为和生理状态。此外,不同类型的细胞悬液可能需要不同的稀释倍数和计数方法。在实验过程中,严格按照操作步骤进行,并保持显微镜视野的清晰,是获得准确计数结果的关键。
总之,细胞计数是一项基础而重要的实验技术,正确的方法和规范的操作能够确保实验数据的可靠性,进而为后续的科学研究提供坚实的基础。
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