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光学和电子显微镜样品制备显微制片法

在进行光学和电子显微镜样品制备时,显微制片法是关键步骤,主要包括切片法、整体封片法、涂片法和压片法四种方法。

首先,切片法是将生物材料如动植物切制成2至25微米的薄片,常用石蜡切片法、棉胶切片法等。石蜡切片法的步骤包括固定、包埋、切片、染色、脱水和封固,以石蜡为支持物,通过一系列处理(固定-水洗-脱水-透明-浸蜡-包埋-切片-贴片-脱蜡-染色-脱水-透明-树脂胶封固)确保样品的完整性。

整体封片法适用于单细胞、微小生物或分散器官的制片,其过程同样包括固定、染色、脱水、透明和封固。例如,草履虫和昆虫口器的制片即采用此法。

涂片法适用于分散性好的标本,如血液,通过将标本均匀涂布在载玻片上完成制片。

压片法则是对天然或处理过的易于分散的组织进行制片,如动物精母细胞、根尖细胞等。通过在载玻片上放置组织,加上盖玻片压碎,使细胞结构平铺,常用于观察染色体,如醋酸洋红、地衣红和石炭酸复红染色。

每种制片法都有其特定的应用场景和步骤,但基本的固定、染色和脱水等步骤在所有方法中都是通用的,以确保样品在显微镜下的清晰观察。

扩展资料

光学和电子显微镜样品制备 optical and electron microscopy,preparation of specimens for 将生物材料制成适于在显微镜下观察的薄片的技术。 光学显微制片技术 光学显微镜制片首先要尽量保持生物材料的天然状态,避免赝像、变形和失真,因此须将生物材料做固定处理;制片必须薄而透明,才能在光学显微镜下成像,除将材料切成薄片或通过轻压或其他手段使之分散外,还需采用其他方法使它透明和染色,以便更好地观察到结构的细节。需长期保存的制片,还应进行脱水和封固。

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