Feulgen染色原理介绍
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- 2025-05-05 01:46:33
Feulgen染色作为DNA定量测定的主要染色方法，自1924年建立以来一直被广泛使用。此方法需要新鲜组织，最好用Carnay氏液固定，酒精-甲醛液次之，单纯甲醛固定效果欠佳。
Feulgen反应法的原理是，DNA经稀盐酸水解后，嘌呤碱基被解离，在核糖一端形成醛基。Schiff试剂中的无色品红可与醛基反应，形成含有醌基的化合物分子，醌基作为发色团，显示出紫红色。DNA经稀酸水解产生的醛基具有还原作用，与无色品红结合形成紫红色化合物，显示DNA分布。
Feulgen染色法鉴定染色体上的DNA存在，主要基于席夫试剂的化学性质。此试剂由碱性品红、偏亚硫酸氢钠(NaHSO3)和盐酸组成，碱性品红在与亚硫酸作用时被氧化，由桃红色变为无色透明的N-亚磺酸亚硫酸副品红碱，与醛基作用时恢复为醌型结构，呈现紫红色。
利用1M HCl在60℃下水解，可将DNA分子中嘌呤碱基与去氧核糖之间的糖苷键打断，嘌呤脱下并使去氧核糖C-1位置释放醛基与席夫试剂反应显紫红色。只有DNA具有这种专一的孚尔根反应，因此利用此反应可以鉴定DNA的存在，并广泛应用于核及染色体的研究中。
扩展资料
DNA-Feulgen染色方法由Feulgen等人在1924年建立，这种方法至今仍然是DNA定量测定的主要染色方法之一。 这种方法的反应机理可表示为下式：2HCl+Na2S2O5→2NaCl+SO2+H2SO3。本词条对这种方法的诞生及机理进行了详细介绍，并针对几个注意事项：对照切片的制做、固定剂的选择、水解时间和Schiff试剂的作用一一进行了说明。
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