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抗核抗体检测方法

对抗核抗体(ANA)的检测方法因其复杂性和多样性,目前采用的技术手段多样,包括免疫荧光法、放射免疫法、酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫双扩散、对流免疫电泳和免疫印迹技术等。

最常用的免疫荧光法是通过荧光免疫组化,通常以小鼠肝切片或印片作为细胞核基质。通过观察在荧光显微镜下核的着色,可以判断为阳性反应。通过血清的稀释试验,如1:80仍为阳性,对系统性红斑狼疮(SLE)的诊断有重要参考价值。荧光核型有四种,如周边型(抗DNA抗体)、均质型(抗DNP抗体)、斑点型(抗ENA抗体)和核仁型(抗核小体抗体),各有其临床诊断价值。

近年来,锥虫或血鞭毛虫(如绿蝇短膜虫试验)也被用于测定抗双链DNA(dsDNA)抗体,因为它们的动基体内含大量纯dsDNA,避免了其他抗原干扰。此试验具有高特异性和敏感性,且短膜虫无害且可人工养殖,便于应用。

放射免疫法如Farr法和过滤法用于检测抗DNA抗体,通过放射性标记和沉淀分析来确定结合活性。ELISA则以间接方法检测抗dsDNA抗体,其重复性和敏感性优于其他方法,已有商业化试剂盒提供。

免疫印迹技术通过凝胶电泳和转印技术,能够对多种自身抗体进行检测,如抗Sm抗体、抗RNP抗体等,具有高灵敏度和特异性。传统方法如琼脂双向扩散、对流免疫电泳、间接血凝和补体结合试验也仍在使用,但它们的应用相对较少。

扩展资料

抗核抗体(antinuclear antibody,ANA)又称抗核酸抗原抗体,是一组将自身真核细胞的各种成分脱氧核糖核蛋白(DNP)、DNA、可提取的核抗原(ENA)和RNA等作为靶抗原的自身抗体的总称,能与所有动物的细胞核发生反应,主要存在于血清中,也可存在于胸水、关节滑膜液和尿液中。

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