免疫细胞化学技术概述
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- 2025-06-19 11:07:33
免疫细胞化学技术是一种应用免疫学原理,通过抗原抗体反应确定组织细胞内抗原位置、性质及量的研究方法。它的核心是利用特异性高的抗体与抗原结合,通过化学显色剂显色来定位分析。
成功的实验要求纯度高、比活性强的抗体,抗原的纯度和免疫原性也是关键。抗原分为完全抗原和半抗原,完全抗原如蛋白质抗原具有免疫原性,半抗原如短肽等则需要与载体结合以增强其免疫活性。常用的载体如钥孔血蓝蛋白和牛血清白蛋白等。
免疫组化实验中,单克隆抗体因其特异性强和产量高而常用,但多克隆抗体虽存在交叉反应,但在石蜡包埋组织切片中应用广泛。抗体的制备涉及动物的选择(如兔子)、佐剂的使用(如弗氏佐剂)以及免疫剂量的确定,这些都是影响抗体效价的重要因素。
通过静脉、腹腔或皮内注射等途径进行免疫,例如家兔初次免疫和加强免疫的剂量和间隔时间都有具体规定。抗体效价检测方法有环状沉淀试验和免疫双向扩散法,后者虽然简便但敏感性较低。最后,放血或定期抽血是收集血清以提取抗体的重要步骤,需注意避免溶血和血清处理的及时性。
扩展资料
免疫细胞化学,与免疫组织化学(Immunohistochemistry)相同,它 是组织化学的分支,它是用标记的特异性抗体(或抗原)对组织内抗原(或抗体)的分布进行组织和细胞原位检测技术。
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