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一文掌握CCK-8细胞增殖&毒性检测法

了解CCK-8细胞增殖和毒性检测法的正确操作是实验的关键。CCK-8，因其高灵敏度和无放射性，常替代MTT法。首先，CCK-8的原理基于细胞线粒体的脱氢酶将WST-8还原为黄色甲瓒物，甲瓒物浓度与活细胞数量成正比。实验步骤如下：

准备实验材料，如酶标仪、96孔板等，还需绘制标准曲线，通过细胞数量和OD值的关系建立检测标准。

细胞增殖检测：制备细胞悬液，按照合适浓度接种到孔中，培养一定时间后，加入CCK-8试剂，混匀并孵育。注意控制时间，根据细胞类型调整。

细胞毒性检测：除药物干预步骤外，其余步骤与增殖检测相同，需确保药物吸收和空白对照的设立。

实验过程中，需注意避免误差，如孔壁上的CCK-8、细胞数量控制、药物影响的处理等。每个步骤都有相应的Q&A，解答了如细胞接种量、CCK-8在不同孔板类型的应用、酚红影响、药物反应处理等常见问题。此外，CCK-8的保存和使用注意事项，以及不同细胞类型对CCK-8反应的差异性都需关注。

确保每个步骤都严格按照规程执行，每次实验前最好重新确认标准曲线，以保证结果的准确性。以上是CCK-8细胞增殖和毒性检测的基本操作指南，以帮助你提升实验效率和准确性。