微生物计数方法有哪些
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- 2025-05-07 01:41:29
微生物计数方法多样，其中血细胞计数法通过将菌液稀释后滴在血细胞计数板上，在显微镜下计算4~5个中格的细菌数，以此估算总菌数。然而此法无法区分死菌与活菌，且对压在小方格界线上的细菌需取平均值计数。该法适用于测定酵母菌种群数量变化，但不适于丝状体微生物。
稀释涂布平板法是常用统计活菌数目的方法，每个活细菌在适宜培养基上可形成一个菌落，代表样品稀释液中的一个活菌。但统计结果通常低于实际活菌数，因为两个活细胞连在一起时，平板上仅显现一个菌落。此法适用于多种材料中的细菌、酵母、芽孢与孢子等数量测定，但不适用于丝状微生物。
滤膜法则在样品菌数较低时适用，将样品通过膜过滤器，干燥、染色后在显微镜下计算膜上的细菌数。此法同样可培养菌落来推算样品中的菌数，如测定饮用水中大肠杆菌数。比浊法基于菌悬液中细胞浓度与混浊度成正比，利用分光光度计测定光密度来表示菌量。显微镜直接计数法则是在稀释涂布的基础上不培养成菌落，通过染色在显微镜下直接计数。
随着技术进步，多种快速、简易、自动化的仪器和装置被开发用于微生物计数。总细胞数和活细胞数的测定方法各异，总细胞数可用电子仪器或直接计数法，而活细胞数则需用膜过滤并在膜上染色后计数。某些类型的细胞倾向于丛生或链生，准确计数需依据“单位体积菌落形成单位”。这些方法适用于大部分细菌和孢子计数，也可用于某些藻类、真菌和原生动物。
在显微镜下计数迅速运动的原生动物时，可使用2-5I甲基纤维素等粘性悬浮培养基降低其运动速度，便于计数。
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