薄层色谱法操作
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- 2025-05-06 06:41:04
薄层色谱法操作步骤如下：
薄层板制备：将固定相和水按1:3的比例混合研磨，排除气泡后涂布于玻板上，厚度为0.2-0.3mm，晾干后在110℃下干燥，检查其均匀度。
分类：手工制板分为无粘合剂的软板和含粘合剂的硬板。
吸附剂选择：吸附剂颗粒大小需适中，氧化铝一般选择100-150目，根据化合物性质选择不同酸碱性的氧化铝。硅胶按活性分为5级。
黏合剂和添加剂：加入适当黏合剂增强薄层强度，根据需要添加添加剂。
薄层板活化：硅胶和氧化铝分别在特定温度下烘烤以激活。
点样：用点样器在板上点样，点样直径不超过5mm，点距一般1-1.5cm，注意保护薄层表面。
展开：选择合适的展开剂，满足纯度、稳定性和选择性要求，展开方式有单次、多次和双向。
影响因素：湿度、溶剂蒸汽、温度和展开距离都会影响分离效果。
显色检测：采用光学、蒸汽、物理和试剂显色法，如紫外光、荧光、碘蒸气显色和试剂显色，以提高分析灵敏度和选择性。
比移值测定：特定化合物的Rf值可用于鉴别，扫描法可用于定量分析。
扩展资料
薄层色谱法（TLC），系将适宜的固定相涂布于玻璃板、塑料或铝基片上，成一均匀薄层。待点样、展开后，根据比移值（Rf）与适宜的对照物按同法所得的色谱图的比移值（Rf）作对比，用以进行药品的鉴别、杂质检查或含量测定的方法。薄层色谱法是快速分离和定性分析少量物质的一种很重要的实验技术，也用于跟踪反应进程。
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