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何为dna的变性,复性和杂交

DNA的变性,复性和杂交是分子生物学中关键的概念。当DNA双链中的氢键因理化因素断裂,双螺旋结构松散,形成单链,这就是DNA变性,这一过程仅影响二级结构,不涉及一级共价键的断裂。检测变性的标志是260nm紫外光吸收值增加,解链程度越高,吸收值增幅越大,即DNA的增色效应。

变性在特定温度范围内发生,解链温度(Tm)与G+C碱基比例、分子长度和环境条件相关。加热、低盐、酸碱条件都可能导致DNA变性。复性则是变性DNA在适宜条件下恢复双螺旋结构,通常通过缓慢冷却实现,最佳条件是低于Tm值25℃。

复性的重要应用是DNA杂交,利用DNA单链间的互补配对性。无论是DNA与DNA、RNA与RNA,还是DNA与RNA之间的部分或全部序列匹配,都能形成新的双链或部分双链结构。这一特性在分子生物学中广泛应用,如基因定位、特异基因检测(Southern Blot、Northern Blot)以及PCR技术等,都是基于这一原理进行的。

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