8kb片段酶切后胶回收效率特别低
- 培训职业
- 2025-05-06 15:45:57
8kb片段酶切后胶回收效率特别低。在探针合成过程中需要对之前回收的质粒进行酶切，割胶回收作为探针合成的模板。但是用到的T7和SP6转录酶要求模板量在20ul体系中要达到1ug。小弟已经用了120ul体系的酶切产物进行割胶回收，回收片段大小在3800bp左右，回收前的电泳图亮度也还可以，但是最后30ul洗脱液洗脱后得到的回收产物浓度却还在10ng/ul以下，用的是takara家的DNA胶回收试剂盒。已经尽量用了小的胶块，胶也完全融了，融胶过柱子的时候重复了一遍，最后洗脱也重复了一遍。洗脱液按照使用说明60度预热了。
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