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你需要的微生物检验基础知识汇总!

一、分类

细菌属于原核细胞型微生物,分类方法包括遗传学和经典传统分类法,前者依据细菌的亲缘关系,后者按界门纲目科属种型株进行。科由共同关系的属组成,属是种的高一级分类单位,描述微生物的主要特征。种是分类的基本单位,同种微生物形态、生理学特征和组成成分基本相同。菌株或品系是同种微生物中不同来源的纯培养物。

二、细菌形态学及形态学检查法

细菌形态结构包括大小、形状、排列及超微结构。细菌结构与其生理功能、致病性、免疫性相关。基本形态有球菌、杆菌、螺旋菌,杆菌是最常见的。大小用微米μm表示,球菌以直径表示,杆菌以长与宽表示。菌龄与细菌大小的关系受代谢废物积累及培养基中渗透压上升等因素影响。结构包含细胞壁、细胞膜、细胞质、核质,特殊结构有鞭毛、菌毛、荚膜、芽孢等。菌毛是革兰氏阴性菌菌体表面的丝状蛋白附属器,也叫纤毛,分为普通菌毛和性菌毛。普通菌毛具有粘着细胞和定居能力,性菌毛通过质粒携带的基因编码,用于细菌间遗传物质的传递。

三、细菌生理学

细菌化学组成包括水、蛋白质、糖类、脂类、无机盐、核酸、维生素等,随细菌种类、菌龄、环境不同而有差异。固定成分占菌体质量15%~25%,主要元素占90%~97%,其他元素占3%~10%。水分占细菌质量75%~85%,芽孢约40%。蛋白质是细菌生命活动的基本物质,核酸分为RNA和DNA,糖类主要以多糖形式存在,脂类是能量储存场所,无机盐类调节渗透压和维持酶活性。生长因子是B族维生素,大多数是菌体内的辅酶成分。色素种类多样,多含氮的有机物。

四、细菌物理性状

带电现象:菌体蛋白质由氨基酸组成,革兰氏阳性菌pH2~3,革兰氏阴性菌pH4~5。多数为中性或弱碱性环境,pH值高于细菌等电点,均带负电荷。环境中pH值越高所带负电荷越多,与细菌的染色反应、凝集反应、抑菌、杀菌作用等有关。

多相胶体:原生质中具有多种蛋白质,为多相胶体,可进行各种性质不同的生化反应。细菌代谢活跃,繁殖速度快,对外界环境因素敏感。布朗运动:在溶液中因受到分散酶分子的撞击,细菌发生不移动位置的颤动。光学性质:菌体呈半透明状态,光线照射细菌时,一部分光被吸收,一部分光发生散射。渗透性:细菌细胞壁和细胞膜具有半渗透性,吸收营养和代谢产物依赖于这种通透作用。细菌具有坚韧的细胞壁,耐受高渗透压,保护细菌在渗透压较低的环境中不致破裂,但在纯水中也不免吸收水分而胀裂。

五、细菌代谢

细菌代谢包括分解代谢和合成代谢。分解代谢是将复杂的营养物质分解为简单的化合物,提供合成菌体成分的原料,同时获得能量。糖类代谢过程包括多糖→单糖→丙酮酸,后续过程因细菌而异。糖发酵试验用于细菌鉴别,产气杆菌的V-P试验阳性,大肠埃希氏菌阴性。甲基红试验检测产气杆菌和大肠埃希氏菌代谢产物的酸性差异。蛋白质代谢过程为蛋白质→蛋白䏡→蛋白胨→多肽→氨基酸,不同细菌分解蛋白质能力不同,可用明胶液化试验或蛋白质消化试验鉴别细菌种类。氨基端分解主要方式有脱氨基作用、脱羧基作用、其他分解作用(生成吲哚、生成硫化氢、分解尿素)。枸橼酸盐利用试验检测产气杆菌与大肠杆菌代谢产物的差异。

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