长沙分析化学检验员证书报考专题湖南水质化验员培训安排-培养基的配制实验步骤

实验目的

1. 明确培养基的配制原理。

2. 掌握配制培养基的一般方法和步骤。

实验内容

学习细菌、放线菌、酵母菌及霉菌四大类微生物培养基的配制。

实验原理

培养基是用于培养、分离、鉴定、保存各种微生物或积累代谢产物的营养基质。各类微生物对营养的要求不同，因此培养基种类繁多。配制适合不同微生物生长发育的培养基，需考虑营养物质、酸碱度、渗透压等因素。

培养基配制步骤

1. 牛肉膏蛋白胨培养基配制方法

(1)称量：精确称取牛肉膏、蛋白胨、NaCl，并溶化。

(2)溶化：加热溶解，补充所需水量。

(3)调pH：用NaOH或HCL调节至所需pH值。

(4)过滤：热过滤，避免某些实验观察影响。

(5)分装：按需分装至试管、三角瓶或半固体容器。

(6)加塞：塞上棉塞，确保通气性能。

(7)包扎：用麻绳绑好试管，外包牛皮纸。

(8)灭菌：高压蒸气灭菌20min。

(9)搁置斜面：冷至50℃，将试管口端捆紧。

(10)无菌检查：置于温室中培养24-48小时。

2. 高氏I号培养基配制方法

(1)称量和溶化：按配方称取可溶性淀粉，溶化。

(2)pH调节、分装、包扎、灭菌及无菌检查：步骤与牛肉膏蛋白胨培养基相似。

3. 马铃薯培养基配制方法

(1)煮沸马铃薯：去皮切块煮沸30分钟，搅拌以防糊底。

(2)过滤并加糖：热过滤，加入糖。

(3)补足失水并溶化琼脂：加热融化并补充失水。

(4)分装、加塞、包扎、灭菌：同前。

4. 查氏培养基配制方法

(1)称量、溶化、调pH：与牛肉膏蛋白胨培养基相似。