测试表征方法:MTT & CCK-8测定细胞毒性和增值优劣
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- 2025-05-04 20:17:38
测试表征方法,MTT与CCK-8,用于评估细胞毒性及增值能力,其原理基于生物化学反应,评估细胞代谢活性。
MTT是一种盐类,能被活细胞线粒体中脱氢酶还原,形成蓝紫色的结晶。细胞毒性导致代谢活动减少,MTT还原量降低,颜色变浅。反之,存活细胞代谢活跃,MTT还原量增加,颜色加深。
CCK-8使用的是水溶性的WST-8衍生物,同样在活细胞线粒体中转化为橙黄色的水溶性产物,反映细胞代谢水平。细胞毒性导致产物生成减少,CCK-8呈现的颜色变淡,表示细胞活性下降。存活细胞则显示较强的颜色,表明代谢水平高。
实验操作时,首先将细胞培养于特定容器内,加入适量的MTT或CCK-8试剂,培养一定时间。之后,加入溶剂使结晶溶解或产物显色,最后通过吸光度值(OD值)的测量评估细胞的毒性与增殖状态。
MTT与CCK-8方法操作简单,结果直观,适用于大规模筛选实验。它们在药物开发、生物材料评估及细胞毒性测试等领域广泛应用。但应注意,细胞种类、培养条件及操作参数需严格控制,以获得准确可靠的实验结果。
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