血型(正定初筛)什么意思

ABO血型定型

常用盐水凝集法检测红细胞上存在的血型抗原，以及血清中存在的血型抗体，依据抗原抗体存在的情况判定血型。常规的方法有：①正向定型：用已知抗体的标准血清检查红细胞上未知的抗原。②反向定型：用已知血型的标准红细胞检查血清中未知的抗体。结果判定：凡红细胞出现凝集者为阳性，呈散在游离状态为阴性。ABO血型定型原则见表1-5-2。[

正向定型法

【目的】 掌握用盐水介质法进行ABO血型系统(ABO group)正定型(direct typing)的原理、操作方法和结果判断。

【原理】 用已知的IgM类特异抗体（标准血清）与被检红细胞在室温条件下、盐水介质中反应，根据红细胞是否出现凝集现象来测定被检红细胞膜上有无与血型抗体相对应的抗原，从而判断和鉴定被检者的血型。

【器材】

1. 小试管、记号笔、蜡笔、试管架。

2. 尖滴管、胶吸头。

3. 吸管、吸耳球。

4. 载玻片或有凹槽的玻璃板或白瓷板。

5. 离心机。

6. 显微镜。

【试剂】

1．标准抗A、抗B血清（商品） 分为人血清ABO血型抗体和人ABO血型单克隆抗体，要求如下：

（1） 人血清ABO血型抗体：①特异性高。②凝集效价：抗A不低于1∶128 ，抗B不低于1∶64。③亲和力：反应开始15s内即出现凝集，3min时明显凝集，血凝块大于1mm2。④稳定性高。⑤已灭活补体。

（2）人ABO血型单克隆抗体：①特异性：抗A抗体特异凝集具有A型红细胞抗原的A1、A2、A1B、A2B；抗B抗体只凝集含B抗原的B和AB型红细胞。②亲和力：以开始反应到出现凝集的时间表示抗血清的亲和力，国家标准是抗A对A1、A2、A2B分别为15s、30s、45s；抗B对B型红细胞为15s。③凝集效价：国家标准是抗A1、抗B均大于1∶128。④稳定性：较人血清抗体的稳定性低。

2．生理盐水。

【标本】 抗凝静脉血或末梢血。

【操作】 制备被检者5％红细胞生理盐水悬液：抗凝血离心或红细胞自然沉降后取试管下层的红细胞2滴于小试管中，加入生理盐水2ml，用尖滴管将红细胞与生理盐水充分混匀。2 500r/min离心3 min后弃去上清液，重复洗涤3次。自管底吸取1滴压积红细胞加入19滴生理盐水中混匀，此即为5％的红细胞生理盐水悬液。

1．玻片法

（1）标记玻片或白瓷板：取洁净的载玻片或白瓷板1块，用蜡笔画出小格，标明抗A、抗B。

（2）加标准抗血清：在玻片或白瓷板已标记的区域内分别滴加抗A、抗B标准抗血清各l滴。

（3）加被检红细胞悬液：在滴加抗A、抗B标准抗血清的小格中分别加被检者5%红细胞生理盐水悬液各1滴；不断轻轻转动玻片或白瓷板，使血清与红细胞充分混匀，连续约1～5 min，室温放置15～30min。

（4）观察结果：肉眼观察有无凝集(或溶血)反应，再用低倍镜观察，判定阴性、阳性和阳性强度。① 凝集判断标准：如红细胞呈均匀分布，无凝集颗粒，显微镜下红细胞分散存在，无凝集靠拢现象为阴性；红细胞出现凝集为阳性。②

凝集强弱程度判断标准：有助于发现A、B亚型，类B抗原。在低倍镜下判断标准。

（5）判断血型结果：表略

（6）报告方式：正定血型（玻片法） X型。

2．试管法

（1）标记试管：取小试管2支，分别标记抗A、抗B。

（2）加标准抗血清：分别滴加抗A、抗B标准血清各1滴于相应标记的试管中。

（3）加红细胞悬液：分别滴加被检者5％ 红细胞生理盐水悬液l滴于各试管中，混匀。

（4）离心：以1 000 r/min离心1 min。

（5）观察结果：取出试管，先观察上层液有无溶血现象，再将试管轻轻摇动使沉于管底的红细胞浮起，肉眼观察有无凝集及凝集强度。①完全凝集：上层液体清亮、无色，底部有红细胞凝块，管底细胞呈花边状，轻弹试管凝块不散开；完全不凝：上层液体清亮、无色，血细胞均匀地沉到管底，边缘整齐，用手指轻弹试管，红细胞上升，随即成为均匀的悬液。②凝集强度判断：标准同玻片法。如轻微凝集或不见凝集，必须将反应物倒于玻片上，再以低倍镜观察。

（6）判断血型结果：按表4-2、图4-3所列的标准判断。

（7）报告方式： 正定血型（试管法） X型。

【注意事项】

1．器材 所用器材必须干燥清洁、防止溶血；为避免交叉污染，试管、尖滴管均一次性使用。

2．试剂 分型血清质量性能应符合合格试剂的要求。

3．标本 被检红细胞标本新鲜，无细菌污染。

4．标记 玻片及试管均应严格标记。

5．加标准抗血清

（1）标准血清从冰箱取出待其平衡至室温后再用，用毕后应尽快放回冰箱保存，减少细菌污染。

（2）操作应按规定程序进行，一般先加血清，然后再加红细胞悬液，以便核实是否漏加血清。

（3）更换抗血清批号或对实验结果有怀疑时可设阳性、阴性对照：分别采取已知A、B、O三种血型的红细胞按要求配制适当浓度的红细胞悬液，与相应抗体比例适当地进行反应后观察结果。

6．红细胞悬液 红细胞悬液浓度过高或过低，抗原抗体比例不适当，使反应不明显，容易误判为阴性反应。

7．离心 离心时间和速度应准确，以防止出现假阳性和假阴性结果。

8．观察凝集

（1）玻片法定型时，转动玻片动作要轻。注意防止悬液干涸，以免将玻片边缘干涸引起的红细胞凝集误认为抗原抗体反应凝集。

（2）理论上IgM抗A和抗B与相应红细胞的反应温度以4℃最强，但为了防止冷凝集现象的干扰，一般仍在室温(20°C～24°C)内进行试验，37°C可使反应减弱。

（3）玻片法反应时间不能少于10 min，否则较弱凝集不能出现，造成假阴性。

（4）观察结果时应注意红细胞呈特异性凝集、继发性凝集以及缗钱状形成的区别。明确溶血的发生提示存在抗原抗体反应，意义同凝集。